撰文/卢荣达
微生物个体微小,但它们同我们的生活联系紧密,在食品,医药,环境等诸多领域均起着重要的作用,微生物检测属于一种重要的检测方法,其背后存在不少鲜为人知的要素,现在,就让我们共同来揭开微生物检测中的这些“秘密”。
一、微生物检验的“前期准备战”
在执行微生物检测之前,各项准备工作仿若一场“精密的战役”。其一为环境准备,检测需在洁净的环境里开展,实验室一般会设置超净工作台,洁净室等设施,这些设施经由过滤空气,控制温湿度等途径,保障检测环境免受外界微生物的污染,恰似医生做手术需要无菌手术室那般,微生物检测同样需要这样一个“无菌战场”。其二是器具和培养基的准备,检测过程中用到的培养皿,吸管,试管等器具均要接受严格的灭菌处理,较为常见的灭菌方法有高压蒸汽灭菌法、干热灭菌法等。
二、样本采集:从“源头”把控
微生物检测的第一步就是样本采集,这一步非常关键,样本质量直接关乎检测结果是否准确。采样时要依照检测目的以及微生物特点来选取恰当的采样手段和部位,拿食品样本来说,应当防止样本被污染,固体食品一般要用无菌工具获取具有代表性的部分;液体食品则需用无菌吸管吸取一定量的样本,而采集人体样本之时,更要严格按照无菌操作规范执行。采集血液样本而言需对采血部位执行严格消毒,防止皮肤上的微生物混入样本。样本采集之后应尽快送检,微生物会随时间流逝而出现变化,若无法及时检测,可能致使结果不准,部分样本必须要在特定环境下保存,譬如冷藏或者冷冻,从而维持微生物的活性。
三、检验方法:多手段探究“微生物世界”
(一)形态学检验
形态学检测就是利用显微镜去观察微生物的形态、大小、结构等特征从而开展鉴定的方法。微生物各有各的形态特点,细菌就有球菌、杆菌、螺旋菌等不一样的形态,真菌具备菌丝和孢子等结构。运用革兰氏染色、芽孢染色之类的染色技术,可以更好地区分微生物的种类,革兰氏染色属于微生物学里经常会用到的一种染色法,该染色法可把细菌分成革兰氏阳性菌与革兰氏阴性菌,这对细菌的初步判定以及抗生素的选择十分关键。
(二)培养法
培养法处于微生物检测范围内,属于较为常见的一种方法,操作时需把样品接种至培养基,给予合适的条件促使微生物成长繁衍,进而形成肉眼可见的菌落,经由对菌落形态、颜色、大小等方面特征实施观测,可初步判定微生物种类,之后还可针对菌落执行进一步的分离纯化与鉴定,从而确定具体所属微生物种类。此方法另外可用于微生物的分离鉴定,而且适用于微生物计数,例如采用平板计数法就能够测量出样品中微生物的数量。
(三)生化检验
生化评定指的是经由检测微生物代谢产物或者酶活性来鉴别微生物的一种方法,微生物有着各异的代谢途径与酶系统,所以可凭借测定微生物对各类底物的利用状况,所生成的代谢产物等指标来辨别微生物的种类。比如,大肠杆菌能够利用乳糖并产酸产气,但沙门氏菌却无法做到,借助乳糖发酵试验便能够初步区分这两种细菌。生化评定方法具备特异性较强,灵敏度较高等优势,其在微生物评定当中被广泛性采纳。
(四)分子生物学检验
伴随分子生物学技术的不断发展,微生物检测愈发重视分子生物学检测手段,其中,聚合酶链式反应(PCR)以及核酸杂交技术较为常见。PCR技术可扩增微生物核酸片段,快速判定样品中是否包含特定微生物核酸,该技术具备高灵敏度,强特异性和快检测速度等优势,而核酸杂交技术则是凭借核酸探针与样品核酸实施杂交来检测微生物的存在。
微生物检测是一份极具挑战性又富有魅力的工作,仿若一双“慧眼”,助力我们找寻隐匿于周边的微生物天地,知晓微生物检测中这些鲜为人知之事以后,我们会更为清晰地意识到微生物检测的重要性,而且也愈加期盼微生物检测技术日后能得到更多超越与发展,从而赋予我们的生活更多守护和便捷。
(作者单位:广西壮族自治区河池市宜州区疾病预防控制中心)