撰文/张研

病理切片制作始于组织样本的规范化处理。外科手术或活检获取的活体组织需在离体后的30分钟内投入10％的中性福尔马林溶液中固定，这一步骤可有效保存细胞形态学特征。经过梯度酒精脱水（酒精浓度从70％逐步提升至100％）、二甲苯透明处理及60℃石蜡包埋等步骤后，病理技师使用精密切片机将组织切割为4微米的超薄切片，相当于人类头发直径的1/20。经苏木精-伊红（HE）染色后，细胞核因苏木精的碱性特性呈现蓝紫色，细胞质经伊红酸性染色呈粉红色，形成医学界通用的染色标准。

二、核心诊断功能

1. 肿瘤性质判定

在400倍光学显微镜下，病理医师通过观察细胞异型性、核分裂像数量及组织结构紊乱程度，可准确区分肿瘤良恶性。确诊甲状腺滤泡癌需观察到包膜浸润或血管侵犯，而滤泡性腺瘤则保持完整的纤维包膜结构。

2. 组织学分型

不同的肿瘤具有不同的特征性形态学表现，如肺腺癌呈现腺管状结构伴黏液分泌，鳞癌可见角化珠和细胞间桥，肉瘤则表现为梭形细胞弥漫性生长。在2021年WHO发布的肿瘤分类标准中，超过80％的实体瘤分型依赖病理切片形态学特征。以胃肠间质瘤（GIST）为例，镜下可见特征性梭形细胞束状排列，经CD117免疫组化染色阳性率可达95％，这成为鉴别诊断的核心依据。

3. 侵袭程度评估

特殊染色技术可清晰显示基底膜完整性。在乳腺癌的诊断中，弹力纤维染色能准确判断肿瘤是否突破导管基底膜，这成为区分原位癌与浸润癌的关键依据。在前列腺癌的诊断中，病理切片可进行Gleason评分系统的测量，通过腺体结构分化程度量化肿瘤侵袭性，评分≥7分提示需要积极干预治疗。

三、精准诊疗的基石

1. 分子检测引导

基于病理切片进行的显微切割技术，可从特定区域精准获取肿瘤细胞。在非小细胞肺癌的诊断中，通过检测EGFR基因突变状态，可使靶向治疗有效率从30％提升至70％。目前临床应用的158种肿瘤靶向药物中，89％需要病理诊断支持。以HER2阳性乳腺癌为例，免疫组化检测（3+）或FISH扩增阳性的患者，使用曲妥珠单抗可使五年生存率提升12％～15％。

2. 治疗反应预测

进行新辅助治疗后，病理切片可量化评估肿瘤退缩分级（TRG）。胃癌患者TRG1级（完全缓解）5年生存率可达85％，显著高于TRG3级的42％。在直肠癌新辅助治疗中，肿瘤消退分级（Mandard分级）与局部复发率呈显著负相关，完全缓解（TRG1）患者3年无复发生存率可达92％。

3. 液体活检校准

循环肿瘤细胞（CTC）检测需与组织病理结果进行对照验证。研究发现，当血液CTC数量超过5个/7.5ml时，病理切片中脉管癌栓检出率可达92％，提示更强的转移倾向。在胰腺癌患者中，病理切片显示的神经侵犯程度与血液ctDNA浓度呈正相关（r=0.68，P<0.01），为动态监测提供了形态学锚点。

四、技术创新融合

现代数字病理系统通过40倍物镜扫描，可将整张切片转化为20亿像素的全景图像，单张切片数据量高达5GB。人工智能辅助诊断系统对乳腺癌淋巴结转移的识别准确率已达97.3％，其中微转移灶（<2mm）的检出灵敏度较人工提升23％。三维病理技术通过连续切片重建，可立体显示肿瘤-间质界面，在脑胶质瘤浸润范围评估中，空间分辨率达到50微米级。质谱成像技术将病理切片与分子图谱叠加，在甲状腺结节的诊断中，特定脂质分子的空间分布可辅助鉴别滤泡癌与腺瘤，诊断符合率提升至89％。

五、质量控制体系

从标本接收到报告签发，全程实施18个质控节点。根据国际标准化组织（ISO）15189认证要求，脱水机运行参数每批次均需记录（石蜡熔点56～58℃，浸蜡时间≥3小时），诊断报告双复核率需达100％。我国《病理科建设与管理指南》规定，三甲医院常规切片优良率需≥95％，其中细胞核染色过深或胞质褪色等缺陷率不得超过5％。冷冻切片诊断时限严格控制在15分钟内，快速病理与常规诊断符合率需≥98％。分子病理实验室每年需参加CAP（美国病理学家协会）室间质评，EGFR基因检测突变检出限需达到1％突变丰度。

（作者单位：河北省唐山市工人医院）